pUT-miniTn5 Cm,pUT-miniTn5 Tel基因重组/转座子载体-BioVector NTCC保藏中心

• pUT-miniTn5 Cm

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• 图谱Map

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The mini-Tn5 are mobile elements able to transpose to the chromosome from a delivery plasmid, by means of the transposase activity encoded by the tnp* gene, which is present in cis in the plasmid but external to the mini-Tn5 element. pUT mini-Tn5 vectors can be used to insert any DNA fragment in the bacterial chromosome, by cloning it within the mini-Tn5 region. Due to the loss of the tnp* gene after insertion, minitransposons are stably integrated into the chromosome and inherited. The different pUTmini-Tn5 vectors can then be used for repeated insertion events and therefore multiple insertions in the same strain are only limited by the availability of distinct selection markers.

Advantages:

• Easy and stable insertion of heterologous DNA in the chromosome of the strain of interest, after few simple genetic manipulations.

• Wide range of inserted fragment sizes.

• Possibility of multiple insertions in the same strain.

• Easy modification of the cloning vector.

• Use of cleavage sites of the rare cutters NotI and SfiI.

• Wide range of Gram negative recipient strains.

Some of the most common applications of pUTmini-Tn5 vectors are:

• Cloning.

• Insertional mutagenesis.

• Promoter probing.

• Generation of conditional phenotypes and non-polar mutations.

• Analysis of transcriptional terminators.

• Environmental applications: tagging with marker genes for monitoring of released microorganisms and/or transcriptional regulation in the environment.

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• pUT mini-Tn5 Cm kit

  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2013), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

  pUT mini-Tn Km kit

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2073), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

  pUT mini-Tn Sm/Sp kit

  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2013), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

  pUT mini-Tn Tc kit

  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2013), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

  PANC-1 mini-Tn5 package

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μg.

  
  

  PANC-1plus miniTn5 package

  • pUT mini-Tn5 Km, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Cm, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Sm/Sp, 2 μg.

  • pUT mini-Tn5 Tc, 2 μg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2013), stab.

  • E. coli DH5a(pRK2073), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

  pUT mini-Tn5Tel kit

  • pUT mini-Tn5Tel vector, 2 μg.

  • Potassium Tellurite, 100mg.

  • E. coli DH5a lpir, stab.

  • E. coli S17-1 lpir, stab.

  • E. coli DH5a(pRK2013), stab.

  • TSS solution, 1.5ml.

  
  

pUT mini-Tn5 vectors

仅用于科研使用

产品简介

通过位于质粒cis上的tnp*基因编码的tansposase（转座酶）的作用，mini-Tn5可被从运载体质粒上转置到染色体上。pUT mini-Tn5载体，可通过在mini-Tn5区域内进行克隆，从而在细菌染色体内插入任何一段DNA片段。在插入片段后，tnp*基因会缺失。因此，mini-

transposon就会稳定的整合到染色体中，并获得稳定遗传。不同的pUT mini-Tn5载体可以用于重复插入片段。因此，要在同一菌体内可实现多次插入，也就只有一个限制因素了，那就是——不同的选择标志物。

应用

pUT mini-Tn5载体的一些最普遍的应用：

-克隆

-插入突变

-启动子探测

-条件性表型和非极性突变的建立

-转录终止分析

-环境应用：用标记基因标识，监控释放到环境中的微生物和基因转录调控

优点

-通过简单的遗传操作，在目标菌株的染色体中，稳定地插入异源DNA

-通过运载质粒的条件复制，实现转座因子选择性地整合到染色体上

-可插入片段大小的范围广

-可实现在同一菌株细胞内多次插入

-对克隆载体实现轻松修饰

-利用罕见的Hot I和Sfi I酶切位点

-广泛应用于革兰氏阴性受体菌

参考文献

1. De Lorenzo V., Timmis K.N. 1994. Methods in Enzymology, 235, p. 386-405.

2. De Lorenzo V., Herrero M., Sanchez J., Timmis K.N. 1998 Microbiology Ecology, 27, p. 211-224.

3. Herrero M., De Lorenzo v., Tmimis K.N. 1990. Journal of Bacteriology, 172, p. 6557-6567.

pUT mini-Tn5产品

仅用于科研

pUT mini-Tn5 protocol

相关产品

pUT mini-Tn5载体体系

Kits

(*) PANC-1 mini-Tn5 package包含pUT mini-Tn5 Cm, pUT mini-Tn5 Km, pUT mini-Tn5 Sm/Sp 和 pUT mini-Tn5 Tc及载体全序列CD盘。 (**) PANC-1 plus mini-Tn5 package包含pUC16Not, pUC18Sfi, TSS solution, E. coliDH5α λpir, E. coliS17-1 λpir, E. ColiDH5α(pRK2013) 和E. coli DH5α(pRK2073)及载体全序列CD盘。

辅助载体

菌株

引物

pUTmini-Tn5 Cm载体

pUTmini-Tn5 Cm载体，是一个具有8686碱基对的质粒，属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Cm。因携带有cat基因，所以，pUTmini-Tn5 Cm具有氯霉素抗性。表达框CmR是由Ω interposon (1)衍生而来，两端是Tn5的I和O末端（末端重复序列），在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内，包含了由156-nt反向重复序列组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)。

pUT mini-Tn5 Km载体

pUT mini-Tn5 Km载体是一个具有7575碱基对的质粒，属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Km。因携带卡那霉素抗性基因（KmR)而具有卡那霉素抗性。其两端是Tn5的I和O末端（末端重复序列）。Mini-Tn5 Km在卡那霉素基因（源于Tn5）左极端处多了一个I末端。表达框具有卡那霉素抗性基因，在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内，连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)。

pUTmini-Tn5 Sm/Sp载体

pUTmini-Tn5 Sm/Sp载体具有7386碱基对的质粒，属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Sm/Sp。mini-Tn5 Sm/Sp携带有性标识——add基因，链霉素和壮观霉素抗性基因。表达框Sm/SpR由interposon衍生而来，两侧有Tn5的I和O末端（末端重复序列），在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内，连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)。

pUTmini-Tn5 Tc载体

pUTmini-Tn5 Tc载体是一个具有7477碱基对的质粒，属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Tc。mini-Tn5 Tc携带有抗性标识——tet基因，四环素抗性基因。表达框TcR由Ω interposon (1)衍生而来，两端连接有Tn5的I和O末端（末端重复序列）。在所有的链接有抗性基因的三个阅读框内，连接有156-nt组成的T4噬菌体基因的32个转录终止密码子和翻译终止密码子(1,2)。

pUTmini-Tn5 Tel载体

pUTmini-Tn5 Tel载体是一个具有8387碱基对的质粒，属于pUTmini-Tn5衍生载体。该载体包含了在pUT链骨架内克隆的迷你转座子mini-Tn5 Tel。mini-Tn5 Tel，携带有选择性标识——亚碲酸钾(K2TeO3，有毒化合物)抗性的cassette。该抗性基因(TelR)由Klebsiella aerogenes (1)的质粒RK2中的Tel AB和 kilA基因编码。TelR位于mini-Tn5迷你转座子的I和O末端（末端序列）之间。

PANC-1 Mini Tn-5 Package

Kit components (Cat. No. KT-3260)

另有

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Dr Xu,Senior Scientist
电邮Biovector@163.com
电话18901268599

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