BioVector® FRT (FR-T) 费舍尔大鼠甲状腺上皮细胞株技术档案

一、 背景与来源说明

FRT（Fischer Rat Thyroid，亦常写作 FR-T）细胞株衍生自费舍尔大鼠（Fischer 344 菌株）的正常甲状腺滤泡上皮细胞。与常规甲状腺细胞系（如 FRTL-5）不同，FRT 属于脱分化/未分化上皮形态，丧失了甲状腺刺激素（TSH）依赖性及摄碘功能，但保留了非常完好的极化上皮屏障 与极高的跨上皮电阻（TEER）。因此，该细胞株被广泛应用于转运体（如 CFTR、ENaC、TMEM16A）、离子通道以及电位/荧光测定高通量药物筛选（HTS）。

二、 细胞生物学特征

• 组织来源：大鼠（Rattus norvegicus，Fischer 344 菌株）甲状腺滤泡上皮细胞

• 生长特性：贴壁生长，多角形铺砖状极化上皮

• 关键功能特性：

  • 高电性屏障：在 Transwell 滤膜上可形成极具完整性的紧密连接，TEER 可达 2000 – 4000 $\Omega \cdot \text{cm}^2$，且旁细胞通透性极低。

  • 非 TSH 依赖：无需在培养基中额外添加 TSH、胰岛素或氢化可的松等甲状腺特异性激素组合。

• 主要表达模型应用：非常适合作为外源离子通道（如野生型与突变型 CFTR 基因、ANO1/TMEM16A）的异源表达宿主（FRT-CFTR 细胞系是囊性纤维化药物开发的金标准模型）。

三、 培养条件与传代指南

1. 完全培养基配方

FRT 细胞对培养基适配性良好，常用以下两种基础培养基：

• 标准配方（Coon's F-12 改良型或 F-12K）：

  • 基础培养基：Coon's Modified F-12 或 F-12K Medium

  • 血清添加：5% – 10% 优质胎牛血清（FBS）

  • 双抗：100 U/mL 青霉素 + 100 $\mu\text{g/mL}$ 链霉素

• 替代配方（DMEM/F-12 混合型）：

  • DMEM/F-12 (1:1) + 10% FBS + 1% L-谷氨酰胺（适用于大多数常规维持与筛选实验）

2. 培养环境与传代规范

• 培养环境：37°C，5% $\text{CO}_2$，饱和湿度。

• 传代比例：1:3 至 1:6 传代，每周传代 2 次。

• 消化操作：使用 0.25% Trypsin - 0.02% EDTA，37°C 消化 3–5 分钟，待细胞脱落后加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打分散。

四、 技术指标简表

BioVector® FRT (FR-T) Fischer Rat Thyroid Cell Line Datasheet

1. Background & Context

The FRT (Fischer Rat Thyroid, also designated as FR-T) cell line was derived from the normal thyroid follicular epithelium of Fischer 344 rats. Unlike standard thyroid cell lines (such as FRTL-5), FRT cells represent a dedifferentiated epithelial phenotype that lacks TSH dependency and iodide uptake capacity. However, they retain a highly developed, polarized epithelial barrier with extremely high transepithelial electrical resistance (TEER). Consequently, FRT serves as a premier heterologous expression platform for ion channels and transporters (e.g., CFTR, ENaC, TMEM16A) and fluorescence-based high-throughput drug screening (HTS).

2. Biological Characteristics

• Organism & Tissue:Rattus norvegicus (Fischer 344 rat), thyroid follicular epithelium.

• Growth Properties: Adherent, cobblestone-like polarized epithelial monolayer.

• Key Functional Features:

  • High Electrical Barrier: Forms intact tight junctions on Transwell inserts, achieving TEER values of 2000 – 4000 $\Omega \cdot \text{cm}^2$ with minimal paracellular leakage.

  • Hormone Independence: Does not require thyroid-stimulating hormone (TSH), insulin, or hydrocortisone for routine maintenance.

• Heterologous Expression Model: Ideal host for expressing wild-type and mutant ion channels (e.g., FRT-CFTR is the gold-standard cell model for Cystic Fibrosis drug discovery).

3. Culture & Handling Protocols

3.1 Complete Growth Medium Formulations

• Standard Formulation (Coon's F-12 / F-12K):

  • Basal Medium: Coon's Modified F-12 or F-12K Medium

  • Serum Supplement: 5% – 10% Fetal Bovine Serum (FBS)

  • Antibiotics: 100 U/mL Penicillin + 100 $\mu\text{g/mL}$ Streptomycin

• Alternative Formulation (DMEM/F-12):

  • DMEM/F-12 (1:1) + 10% FBS + 1% L-Glutamine

3.2 Incubation & Subculture Parameters

• Incubation Conditions: 37°C, 5% $\text{CO}_2$, humidified atmosphere.

• Split Ratio & Frequency: 1:3 to 1:6 split ratio, passaged 2 times per week.

• Detachment: Treat with 0.25% Trypsin - 0.02% EDTA at 37°C for 3–5 minutes. Neutralize with complete serum-containing medium and gently dissociate into a single-cell suspension.

4. Technical Data Summary

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