BioVector® HAT-7 大鼠成釉细胞株 / HAT-7 Rat Ameloblast Cell Line

一、 背景与来源说明 / Background & Origin

HAT-7 是一种来源于大鼠切牙牙釉质上皮（Apical Bud of Rat Incisor Enamel Organ）的上皮样成釉细胞株（Ameloblast-like Cell Line）。该细胞系保留了成釉细胞分化、牙釉质基质蛋白分泌以及矿化调控的关键生理功能。HAT-7 是研究牙齿发育（Odontogenesis）、牙釉质形成机制（Amelogenesis）、牙釉质基质蛋白表达调控、氟斑牙（Fluorosis）病理机制以及口腔组织工程与再生医学的经典细胞模型。

二、 细胞生物学特征 / Biological Characteristics

• 组织来源 / Tissue Origin：大鼠切牙牙釉质器官 (Rat Incisor Enamel Organ)

• 生长特性 / Growth Properties：贴壁生长，呈典型铺路石状 (Cobblestone-like) 上皮形态

• 细胞标记物 / Cell Markers：

  • 成釉细胞特异性蛋白：成釉蛋白 (Amelogenin, AMELX)、鞘蛋白 (Ameloblastin, AMBN)、釉蛋白 (Enamelin, ENAM)

  • 矿化与蛋白酶标记物：基质金属蛋白酶 20 (MMP-20)、激肽释放酶 4 (KLK-4)

• 应用领域 / Applications：牙釉质发育与生物矿化机制研究、牙釉质基质基因调控、口腔毒理学（如氟化物对成釉细胞的影响）及生物牙齿再生

三、 培养条件与传代指南 / Culture & Handling Protocols

1. 完全培养基配方 / Medium Formulation

• 基础培养基 / Basal Medium：DMEM/F-12 (1:1 混合) 基础培养基

• 血清与添加剂 / Serum & Supplements：

  • 10% 胎牛血清 (FBS)

  • 重组人表皮生长因子 (rhEGF, 建议 10 ng/mL)

  • 氢化可的松 (Hydrocortisone, 建议 0.4 ug/mL)

• 抗生素 / Antibiotics：100 U/mL 青霉素 + 100 ug/mL 链霉素

2. 培养与传代操作 / Incubation & Subculture

• 培养环境 / Conditions：37 摄氏度，5% CO2，饱和湿度

• 密度管理 / Confluence：保持细胞密度在 30% 到 80% 之间，避免过度汇合导致细胞重叠脱落或自发分化

• 传代步骤 / Procedure：

  1. 吸除旧培养基，用 PBS 洗涤一次。

  2. 加入 0.25% Trypsin-EDTA，在 37 摄氏度下孵育 3 到 5 分钟至细胞脱落。

  3. 加入含血清完全培养基终止消化并轻柔吹打均匀。

  4. 以 200 x g 离心 5 分钟，重悬后按 1:2 至 1:4 比例接种。

四、 技术指标简表 / Technical Data Summary

BioVector® HAT-7 Rat Ameloblast Cell Line

1. Background and Origin

HAT-7 is an epithelial-like ameloblast cell line derived from the apical bud of rat incisor enamel organs. The cell line retains essential functions of functional ameloblasts, including enamel matrix protein expression and mineralization capacity. HAT-7 serves as a standard model for investigating amelogenesis, enamel matrix gene regulation, dental tissue engineering, and enamel pathologies such as dental fluorosis.

2. Biological Characteristics

• Tissue Origin: Rat Incisor Enamel Organ

• Growth Properties: Adherent, cobblestone-like epithelial morphology

• Cell Markers:

  • Enamel matrix proteins: Amelogenin (AMELX), Ameloblastin (AMBN), Enamelin (ENAM)

  • Enamel proteases: Matrix Metalloproteinase-20 (MMP-20), Kallikrein-4 (KLK-4)

• Applications: Amelogenesis mechanisms, enamel matrix gene transcription, fluoride toxicity testing, and dental bio-engineering research

3. Culture and Handling Protocols

Culture Medium Formulation

• Basal Medium: DMEM/F-12 (1:1 mixture)

• Serum and Additives: 10 percent Fetal Bovine Serum (FBS), supplemented with 10 ng/mL rhEGF and 0.4 ug/mL Hydrocortisone

• Antibiotics: 100 U/mL Penicillin and 100 ug/mL Streptomycin

Incubation and Subculture Guide

• Incubation Conditions: 37 degrees Celsius, 5 percent CO2, humidified atmosphere

• Confluence Management: Maintain cell density between 30 percent and 80 percent to prevent cell peeling or unscheduled differentiation

• Subculture Procedure:

  1. Remove spent media and wash once with PBS.

  2. Add 0.25 percent Trypsin-EDTA and incubate at 37 degrees Celsius for 3 to 5 minutes until cells detach.

  3. Neutralize with complete medium and mix gently.

  4. Centrifuge at 200 x g for 5 minutes, resuspend, and seed at a ratio between 1:2 and 1:4.

4. Technical Data Summary

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