BioVector® N2a-APPSwe 神经母细胞瘤细胞系 / N2a-APPSwe Neuroblastoma Cell Line  

一、 背景与来源说明 / Background & Origin  

BioVector® N2a-APPSwe（又称 N2a-APPsw 或 N2a-swe）是一种广泛应用于阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease, AD）机制研究与药物筛选的转基因小鼠神经母细胞瘤细胞系。该细胞系由小鼠 N2a（Neuro-2a）神经母细胞瘤细胞稳定转染表达人源淀粉样前体蛋白瑞典突变型（Human Amyloid Precursor Protein Swedish Mutation, APPSwe / APP K670N/M671L）质粒构建而成。  

APPSwe 双位点突变会显著增强 β-分泌酶（BACE1）对 APP 的剪切效能，导致细胞持续、高效地分泌 Aβ_1-40 及强毒性的 Aβ_1-42 淀粉样蛋白。它是研究 APP 异常加工剪切、Aβ 聚集致毒机制、Tau 蛋白异常磷酸化以及抗 AD 小分子候选药物体外筛选的经典体外细胞模型。  

图：显微镜下的神经母细胞瘤细胞形态示意图

二、 细胞系生物学特征 / Cell Line Characteristics  

• 细胞类型 / Cell Type：小鼠神经母细胞瘤细胞（表达人源 APPSwe） / Mouse Neuroblastoma Cell Line stably expressing Human APPSwe

• 组织来源 / Tissue Source：小鼠神经脑组织 / Mouse Brain tissue; Neuroblastoma

• 生长特性 / Growth Mode：贴壁生长（Adherent） / Adherent

• 细胞形态 / Morphology：阿米巴样/神经元样（全反式维甲酸 ATRA 诱导后可伸出明显神经突触） / Amoeboid / Neuronal-like

• 基因表型与标志物 / Genetic Profile & Markers：      

  • 转基因突变：稳定表达 Human APP₆₉₅ Swedish Mutation (K670N/M671L)

  • 功能特性：高水平表达/分泌 Aβ_1-40 及 Aβ_1-42 寡聚体

  
  

• 筛选标记 / Selection Marker：通常含 BioVector® G418（Geneticin, 200–400 ug/mL） 抗性基因，用于维持转基因稳定表达

• 主要应用 / Key Applications：阿尔茨海默病（AD）病理学研究、Aβ 产生与分泌测定（ELISA/Western Blot）、BACE1/γ-Secretase 抑制剂筛选、神经保护药物评估

三、 细胞培养与传代指南 / Cell Culture & Passage Protocol  

1. 培养基与条件 / Media & Environmental Conditions

• 基础培养基 / Basal Medium：BioVector® DMEM/F12 培养基 或 BioVector® Opti-MEM / DMEM 培养基

• 添加成分 / Supplements：10% BioVector® 胎牛血清（FBS） + 1% BioVector® 双抗（Penicillin-Streptomycin, 100 U/mL） + BioVector® G418 (200 ug/mL)（维持选择压）

• 培养环境 / Culture Conditions：37 摄氏度，5% CO2 饱和湿度培养箱 / 37°C, 5% CO2

2. 传代操作步骤 / Passaging Protocol

1. 洗涤与消化 / Wash & Trypsinization：吸弃旧培养基，用 BioVector® PBS 缓冲液 洗涤 1 次；加入 BioVector® 0.25% Trypsin-EDTA 消化液，室温或 37 摄氏度消化 1–2 分钟（N2a 细胞贴壁相对较松，消化速度较快）。

2. 终止与离心 / Termination & Centrifugation：显微镜下观察到细胞脱落圆缩后，加入含血清培养基终止消化，1000 rpm（约 200 g）离心 3–5 分钟。

3. 重悬与接种 / Resuspension & Seeding：弃上清，用含 BioVector® G418 的新鲜培养基重悬，按 1:3 至 1:6 的比例接种，每 2–3 天传代一次。

四、 技术指标简表 / Technical Data Summary  

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