BioVector® J-Lat 10.6 HIV 潜伏感染细胞系 / J-Lat Clone 10.6 Cell Line

一、 背景与机制说明

BioVector® J-Lat Clone 10.6 细胞系（常用名：J-Lat 10.6；Cellosaurus 编号：CVCL_8281）是用于研究 HIV-1 潜伏感染（Latent HIV Infection）与潜伏逆转/激活剂（Latency Reversing Agents, LRAs） 的国际标准潜伏感染细胞模型。

该细胞系以人 T 淋巴细胞白血病细胞（Jurkat 细胞）为宿主，通过假型化（Pseudotyped）逆转录病毒载体感染衍生而来。其基因组中整合了全长但带有缺失/突变的 HIV-1 基因组片段，其中 HIV 的 env 基因被替换为绿色荧光蛋白基因（GFP），即 HIV-R7/E-/GFP：

• 潜伏状态（Basal state）：在静息无刺激状态下，LTR 启动子处于转录抑制状态，细胞不表达 GFP 或仅有极低背景荧光。

• 激活/逆转状态（Stimulated state）：当受到 LRAs（如 PMA、Prostratin、HDAC 抑制剂如 SAHA/Vorinostat、PKC 激活剂或 TNF-α）刺激时，HIV-1 LTR 启动子被激活，驱动 GFP 表达。可以通过流式细胞术（FACS）或荧光显微镜定量分析 GFP 阳性细胞比例，从而评估药物对 HIV 潜伏的逆转/激活效率。

二、 细胞形态与流式检测示意图

下表展示了 J-Lat 10.6 细胞系在不同状态下的典型形态与流式细胞术（FACS）检测示意：

三、 细胞特征与培养条件

• 细胞名称：J-Lat Clone 10.6 (J-Lat 10.6) 人 T 淋巴细胞 HIV 潜伏感染细胞系

• 种属起源：人（Homo sapiens）

• 组织来源：外周血 / T 淋巴细胞（Jurkat 衍生）

• 细胞形态：淋巴母细胞样（Lymphoblast-like），悬浮生长，常呈小团块状

• 生长特性：悬浮生长（Suspension）

• 培养基体系：RPMI-1640 培养基 + 10% 优质胎牛血清（FBS）+ 1% 双抗（Penicillin-Streptomycin）

• 培养条件：37°C，5% $\text{CO}_2$，饱和湿度

• 传代比例与密度：维持细胞密度在 $2 \times 10^5$ 至 $1 \times 10^6\text{ cells/mL}$ 之间，每 2–3 天按 1:3 至 1:5 比例传代

• 冻存液配方：90% 完全培养基 + 10% DMSO

四、 实验应用与操作指南

1. 细胞复苏与悬浮培养

1. 快速融化：将冻存管置于 37°C 水浴中轻柔摇晃融化（约 1–2 分钟）。

2. 离心洗涤：将细胞悬液转移至含 5 mL 预热 RPMI-1640 完全培养基的离心管中，1000 rpm（约 190×g）离心 5 分钟，弃上清。

3. 重悬接种：用预热的 RPMI-1640 完全培养基重悬，接种至 T25 培养瓶中，置于 37°C、5% $\text{CO}_2$ 培养箱中培养。

2. HIV 潜伏逆转 / 激活筛选实验（LRA Screening Assay）

1. 收集对数生长期的 J-Lat 10.6 细胞，调整细胞密度至 $5 \times 10^5\text{ cells/mL}$ 接种于 24 孔或 96 孔板。

2. 加入待测化合物（如 HDACi、PKC 激活剂或阳性对照 PMA 10–100 ng/mL / TNF-α 10–20 ng/mL）。

3. 于 37°C 培养箱中孵育 24–48 小时。

4. 收集细胞，利用流式细胞仪（FACS）检测 FITC/GFP 通道，计算 GFP 阳性细胞百分比（% GFP+） 及平均荧光强度（MFI）。

五、 技术指标简表

BioVector NTCC质粒载体菌株细胞蛋白抗体基因保藏中心

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