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产品分类
pet32a载体基本信息
EMD Biosciences(Novagen) |
pET32a, pet 32a |
大肠杆菌蛋白表达 |
高 |
多克隆位点,限制性内切酶 |
5900bp |
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3' |
thioredoxin (N端); His (中间和C端) |
氨苄 |
pET32a载体用于表达可溶性,具有活性功能的蛋白;pET-32a(+)载体具有N端Thrombin(凝血酶)酶切位点,N端肠激酶酶切位点。pET32啊,pET32b,pET32c载体的差异主要是在于多克隆位点,其他地方完全一致。 |
69015-3 |
瞬时表达 |
组成型 |
非病毒 |
pet32a载体质粒图谱和多克隆位点信息
pet32a载体简介
pET32系列载体是设计用来克隆构建和高水平融合表达表达带有109个氨基酸Trx标签的蛋白质序列。将基因插入到载体的多克隆位点,能够获得融合表达蛋白质。同时融合蛋白包含有His标签和S标签,这些可以用于蛋白表达检测和纯化过程。
载体的多克隆位点见上面的图谱。需要注意的是图谱中的核苷酸编码顺序是以pBR322载体的复制方向为正方向,所以T7表达区域在图谱中是处于反向的位置。T7 RNA聚合酶启动的克隆和表达区域在质粒图谱中也被标注了出来。质粒的F1复制子是被定向的,所以在T7噬菌体聚合酶的作用下,包含有蛋白编码序列的病毒 粒子能够产生,并启动蛋白表达,同时蛋白表达将被T7终止子序列(Cat. No. 69337-3)的作用下终止蛋白翻译。
pet32a载体序列
SOURCE
ORGANISM
COMMENT This file is created by Vector NTI
http://www.biofeng.com/
COMMENT ORIGDB|GenBank
COMMENT VNTAUTHORNAME|biofeng.com|
COMMENT VNTOAUTHORAD1|Novagen Inc.|
FEATURES Location/Qualifiers
promoter complement(764..780)
/vntifkey="30"
/label=T7\promoter
misc_signal complement(366..692)
/vntifkey="87"
/label=trx\tag
protein_bind complement(327..344)
/vntifkey="31"
/label=His\tag
misc_feature complement(249..293)
/vntifkey="21"
/label=S\tag
protein_bind 140..157
/vntifkey="31"
/label=His\tag
terminator complement(26..72)
/vntifkey="43"
/label=T7\terminator
CDS 1171..2250
/vntifkey="4"
/label=lac\I
rep_origin complement(3684..3684)
/vntifkey="33"
/label=ColE1\pBR322\origin
CDS complement(4445..5302)
/vntifkey="4"
/label=bla\(amp)\sequence
rep_origin complement(5434..5889)
/vntifkey="33"
/label=f1\origin
CDS complement(737..761)
/vntifkey="4"
/label=lac\operator
protein_bind complement(219..233)
/vntifkey="31"
/label=enterokinase
protein_bind complement(300..317)
/vntifkey="31"
/label=thrombin
BASE COUNT 1391 a 1564 c 1560 g 1385 t
ORIGIN
1 atccggatat agttcctcct ttcagcaaaa aacccctcaa gacccgttta gaggccccaa
61 ggggttatgc tagttattgc tcagcggtgg cagcagccaa ctcagcttcc tttcgggctt
121 tgttagcagc cggatctcag tggtggtggt ggtggtgctc gagtgcggcc gcaagcttgt
181 cgacggagct cgaattcgga tccgatatca gccatggcct tgtcgtcgtc gtcggtaccc
241 agatctgggc tgtccatgtg ctggcgttcg aatttagcag cagcggtttc tttcatacca
301 gaaccgcgtg gcaccagacc agaagaatga tgatgatgat ggtgcatatg gccagaacca
361 gaaccggcca ggttagcgtc gaggaactct ttcaactgac ctttagacag tgcacccact
421 ttggttgccg ccacttcacc gtttttgaac agcagcagag tcgggatacc acggatgcca
481 tatttcggcg cagtgccagg gttttgatcg atgttcagtt ttgcaacggt cagtttgccc
541 tgatattcgt cagcgatttc atccagaatc ggggcgatca ttttgcacgg accgcaccac
601 tctgcccaga aatcgacgag gatcgccccg tccgctttga gtacatccgt gtcaaaactg
661 tcgtcagtca ggtgaataat tttatcgctc atatgtatat ctccttctta aagttaaaca
721 aaattatttc tagaggggaa ttgttatccg ctcacaattc ccctatagtg agtcgtatta
781 atttcgcggg atcgagatcg atctcgatcc tctacgccgg acgcatcgtg gccggcatca
841 ccggcgccac aggtgcggtt gctggcgcct atatcgccga catcaccgat ggggaagatc
901 gggctcgcca cttcgggctc atgagcgctt gtttcggcgt gggtatggtg gcaggccccg
961 tggccggggg actgttgggc gccatctcct tgcatgcacc attccttgcg gcggcggtgc
1021 tcaacggcct caacctacta ctgggctgct tcctaatgca ggagtcgcat aagggagagc
1081 gtcgagatcc cggacaccat cgaatggcgc aaaacctttc gcggtatggc atgatagcgc
1141 ccggaagaga gtcaattcag ggtggtgaat gtgaaaccag taacgttata cgatgtcgca
1201 gagtatgccg gtgtctctta tcagaccgtt tcccgcgtgg tgaaccaggc cagccacgtt
1261 tctgcgaaaa cgcgggaaaa agtggaagcg gcgatggcgg agctgaatta cattcccaac
1321 cgcgtggcac aacaactggc gggcaaacag tcgttgctga ttggcgttgc cacctccagt
1381 ctggccctgc acgcgccgtc gcaaattgtc gcggcgatta aatctcgcgc cgatcaactg
1441 ggtgccagcg tggtggtgtc gatggtagaa cgaagcggcg tcgaagcctg taaagcggcg
1501 gtgcacaatc ttctcgcgca acgcgtcagt gggctgatca ttaactatcc gctggatgac
1561 caggatgcca ttgctgtgga agctgcctgc actaatgttc cggcgttatt tcttgatgtc
1621 tctgaccaga cacccatcaa cagtattatt ttctcccatg aagacggtac gcgactgggc
1681 gtggagcatc tggtcgcatt gggtcaccag caaatcgcgc tgttagcggg cccattaagt
1741 tctgtctcgg cgcgtctgcg tctggctggc tggcataaat atctcactcg caatcaaatt
1801 cagccgatag cggaacggga aggcgactgg agtgccatgt ccggttttca acaaaccatg
1861 caaatgctga atgagggcat cgttcccact gcgatgctgg ttgccaacga tcagatggcg
1921 ctgggcgcaa tgcgcgccat taccgagtcc gggctgcgcg ttggtgcgga catctcggta
1981 gtgggatacg acgataccga agacagctca tgttatatcc cgccgttaac caccatcaaa
2041 caggattttc gcctgctggg gcaaaccagc gtggaccgct tgctgcaact ctctcagggc
2101 caggcggtga agggcaatca gctgttgccc gtctcactgg tgaaaagaaa aaccaccctg
2161 gcgcccaata cgcaaaccgc ctctccccgc gcgttggccg attcattaat gcagctggca
2221 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaatg taagttagct
2281 cactcattag gcaccgggat ctcgaccgat gcccttgaga gccttcaacc cagtcagctc
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